BAKTERIOLOGICKÁ SLUČKA: VLASTNOSTI, TYPY, POUŽITIA - BIOLÓGIE - 2026

Bakteriologická slučka je pracovný nástroj používaný mikrobiológovia pre siatie mikrobiálnych kultúr (baktérií alebo húb). Je to pravdepodobne nástroj, ktorý títo odborníci najviac využívajú.

Jeho použitie sa zdá byť jednoduché, ale v skutočnosti si vyžaduje veľa tréningu. Pred začatím siatia sa musí slučka sterilizovať v Bunsenovom horáku, potom sa odoberie mikrobiálne inokulum, ktoré môže pochádzať z kvapalnej kultúry alebo z pevnej kultúry.

Druhy bakteriologických slučiek. Zdroj: Nebol poskytnutý žiadny strojom čitateľný autor. お や お prevzaté (na základe nárokov na autorské práva).

Akonáhle je inokulum odobraté, môže byť uložené v tekutom médiu alebo naočkované do pevného média. Po každej procedúre sa slučka opäť sterilizuje. Rukoväť je tiež vhodná na vytváranie mikrobiálnych náterov na podložnom sklíčku.

Bakteriologická slučka má veľa názvov vrátane: platinovej slučky alebo slučky, očkovacej slučky alebo očkovacej slučky, jej skutočným názvom je Kohleova slučka.

Materiál, ktorým je držadlo vyrobené, je obvykle zliatina niklu a chrómu (nichróm) alebo platina. Ďalšou odrodou dostupnou na trhu sú plastové jednorazové bakteriologické slučky.

Na druhej strane existuje niekoľko typov bakteriologických slučiek, z ktorých každá plní funkciu v rámci úloh, ktoré vykonáva mikrobiológ. Výber rukoväte bude závisieť od toho, čo je potrebné urobiť.

Napríklad na uskutočnenie striata vyčerpaním, aby sa izoloval mikroorganizmus, sa použije platinová slučka, ktorá končí v uzavretom kruhu bez ohľadu na to, či je kalibrovaná alebo nie.

Keďže, ak je potrebné zasiať vzorku moču, kde je dôležité kvantifikovať CFU, je potrebné použiť kalibrovanú slučku. Podobne pri inokulácii biochemických testov, ktoré si vyžadujú zasiatie vpichom, je nevyhnutná slučka ihly. Je dôležité, aby s rukoväťou manipuloval školený personál.

vlastnosti

Bakteriologické slučky sa skladajú z dvoch extrémov. Jeden koniec zodpovedá rukoväti alebo základni, zatiaľ čo druhým je rukoväť samotná.

Rukoväť základne alebo rukoväte

Základňa slúži na uchopenie rukoväte počas manipulácie. Je zvyčajne kovový, ale má tepelný izolátor, ktorý zabraňuje popáleniu obsluhy, keď je špička rukoväte na zapaľovači sterilizovaná. Meria približne 20 cm, aj keď môže byť dlhšia. Má závit na nastavenie rukoväte.

rukoväť

Je to funkčný koniec, to znamená časť, ktorá prichádza do styku s mikroorganizmami a kultivačnými médiami. Skladá sa z jemného drôtu, ktorý sa vkladá do základne.

Rukoväť môže byť vyrobená z nichrómu alebo platiny, preto sa niekedy nazýva platinová rukoväť. Má dĺžku približne 6,5 cm a má rozchod približne 0,20 mm. Rukoväť s rukoväťou môže merať 26,5 cm. Merania sa môžu líšiť od výrobcu k výrobcovi.

druhy

Existuje niekoľko typov bakteriologických slučiek a každá z nich má špecifické použitie. Typy rukovätí sú nasledujúce: kalibrovaná rukoväť v tvare prstenca, nekalibrovaná rukoväť v tvare kruhu, rovná alebo ihlová rukoväť, špachtle, rukoväť v tvare „L“ a rukoväť s ostrým hrotom.

Na druhej strane môžu byť rukoväte trvalé alebo jednorazové. Tie, ktoré sú určené na trvalé použitie, sa sterilizujú v zapaľovačoch, sú opätovne použiteľné a veľmi trvanlivé. Aj keď sú jednorazové výrobky z výroby sterilné, používajú sa iba raz a sú vyradené.

aplikácia

Rukoväť prsteňa, nie kalibrovaná

Je to najpoužívanejšia rukoväť v mikrobiologickom laboratóriu. Používa sa na očkovanie mikrobiálnej suspenzie (tekuté médium) alebo časti kolónie (tuhé médium), ktorá sa naočkuje do iného kultivačného média, a to buď biochemickým testom alebo prípadne obohatenejším alebo selektívnejším médiom. Je tiež užitočný na vytváranie mikrobiálnych náterov na podložnom sklíčku.

S týmto typom slučky môže byť počiatočné inokulum pruhované. Je tiež navrhnutý tak, aby hladko kĺzal po agare bez toho, aby ho poškodil. To samozrejme vyžaduje, aby vyškolený personál zvládal techniku ​​sejby, pričom použil správnu silu a pohyby, aby sa dosiahol dobrý ťah.

S touto rukoväťou je možné uskutočňovať rôzne techniky očkovania. Napríklad tuhé médiá v Petriho miskách sa zvyčajne naočkujú vyčerpaním (existuje niekoľko techník, pozri video 1).

Účelom tejto techniky je získať izolované kolónie, aby sa študovali a identifikovali, najmä ak je vzorka polymikrobiálna, to znamená, že kultúra nie je čistá (obsahuje viac ako jeden typ mikroorganizmu).

Namiesto toho sa kliny vysadia do jednoduchého kľukatca, aby sa získala bakteriálna hmota, pričom v tomto prípade nie je potrebné izolovať kolónie.

Niekedy sa používajú aj na odoberanie určitých vzoriek. Napríklad Rojas a kol., Použil bakteriologickú slučku na odobratie poškriabaných vzoriek vaginálneho tkaniva od potkanov.

Bakteriologická slučka so špičkou krúžku, nie kalibrovaná. Zdroj: Pixinio.com

Rukoväť v tvare prstenca, kalibrovaná

Tento popisovač, ako naznačuje jeho názov, je kalibrovaný tak, aby obsahoval konkrétne množstvo mikrobiálnej suspenzie. Používa sa, keď je potrebné, aby inokulum vyhovovalo štandardom v odbore.

Napríklad je veľmi bežné pri pestovaní močových kultúr. V tomto prípade sa môže použiť kalibrovaná slučka 0,01 ml a 0,001 ml.

Malo by sa poznamenať, že kalibrované rukoväte majú rezervu chyby, ktorá sa mení podľa uhla, s ktorým sa vzorka odoberá, a veľkosti ústia nádoby.

Ak sa 0,001 ml slučka vloží vertikálne do nádoby s malým hrdlom (≤ 7 mm), odobraté množstvo bude o 50% nižšie, ako sa požaduje.

K tomu dochádza, pretože čím menší je priemer ústia nádoby, tým vyššie je povrchové napätie, a preto sa zvyšujú adhézne sily medzi (sklo - kvapalina). To spôsobí, že náboj kvapaliny zachytávaný rukoväťou bude menší.

Keďže, ak sa odoberie v uhle 45 ° v nádobe so širokými ústami (≥ 22 mm), je možné zozbierať o 150% viac, ako je požadované množstvo. V tomto prípade je povrchové napätie nižšie a súdržné sily sklo / plast sa znižujú, zatiaľ čo sa zvyšuje súdržná sila kvapalina-kvapalina.

Kvôli vyššie uvedenému sú pre močové kultúry niekedy výhodné ďalšie metódy na kvantifikáciu jednotiek tvoriacich kolónie.

Rovná alebo ihlová rukoväť

Nazýva sa to aj úchyt nite. Používa sa na očkovanie určitých biochemických testov, najmä tých, ktoré vyžadujú očkovanie technikou vpichu. Príkladom sú polotuhé médiá, ktoré sa pripravujú vo forme bloku, ako napríklad: médium SIM, MIO a O / F.

Okrem toho v prípade MIO a SIM, ktoré hodnotia motilitu, je nevyhnutné, aby sa punkcia vykonala pomocou ihlovej slučky, pretože interpretácia pozitívnej motility nastane, keď baktérie rastú smerom k stranám pôvodného inokula.

Test naočkovaný slučkovou slučkou môže skresliť výsledky (falošne pozitívne). Z tohto dôvodu sa musí pri tomto type očkovania dbať na to, aby bol defekt jedinečný a aby po odstránení vychádzal rovnakým smerom, do ktorého vstúpil.

Ďalším testom, ktorý musí byť očkovaný ihlou, aj keď je pripravený v klinovom tvare, je Kligler. Pri tomto teste sa neodporúča, aby kyslík prenikol hlboko do agaru, pretože na uskutočnenie určitých chemických reakcií je potrebné médium chudobné na kyslík. Táto rukoväť sa používa aj na dotyk konkrétnej kolónie za účelom subkultivácie.

Rukoväť špachtle

Väčšina mikroorganizmov dáva mäkké kolónie, ktoré sa dajú ľahko preliať. Existujú však niektoré mikrobiálne látky, ktorých kolónie sú tvrdé a suché, napríklad mykobaktérie všeobecne a niektoré huby. V týchto prípadoch je užitočné použiť špachtle.

Rukoväť v tvare "L"

Najčastejšie sa používa na potlačenie plesňových kultúr, najmä plesní.

Ostré držadlo hrotu

Je užitočný na odoberanie veľmi malých kolónií prítomných v polymikrobiálnych kultúrach, aby sa mohli subkultivovať.

Sejacie techniky

Video 1

Sterilizácia držadla z platiny

Rukoväť musí byť pred a po použití sterilizovaná. Pri sterilizácii bakteriologickej slučky v zapaľovači postupujte nasledovne: rukoväť by mala byť umiestnená v hornej časti plameňa tak, aby zaujala čo najvyššiu vertikálnu polohu tak, aby sa sterilizovala od špičky smerom nahor.

Keď jemné vlákno zmení farbu na jasne červenú, dá sa povedať, že je sterilný. Na použitie sa ochladí a odoberie sa vybraná vzorka. (Pozri video 2).

Sterilizácia bakteriologickej slučky

Video 2

Referencie

1. „Bakteriologická slučka“ Wikipedia, Encyklopédia zadarmo. 23. júla 2019, 13:31 UTC. 18. augusta 2019, 22:45. Wikipedia.
2. Herrera D, López P, Duque J, Pérez L, Golding R, Hernández C. Kalibrované kovové kľučky pre mikrobiológov: Alternatíva vnútroštátnej výroby. Soc. Microbiol. 2010; 30 (1): 37-42. K dispozícii na: ve.scielo.org
3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey a Scott Mikrobiologická diagnostika. 12 ed. Editorial Panamericana SA Argentína.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologická diagnostika. 5. vydanie. Editorial Panamericana SA Argentína.
5. Rojas A, Pardo-Novoa J, RíoR, Gómez-Hurtado M, Limón D, Luna F, a kol. Stanovenie analgetického účinku hexánového extraktu z kvetov Eupatorium arsenei na modeli akútnej bolesti u potkanov. mex. veda. farme. 2015; 46 (1): 64 - 69. K dispozícii na: scielo.org