ANTISTREPTOLYZÍN O: KVANTIFIKÁCIA, ODÔVODNENIE, TECHNIKA, PATOLÓGIE - BIOLÓGIE - 2026

O ASO je protilátka tvorená v reakcii na infekcie spôsobené Streptococcus pyogenes, tiež známy ako Streptococcus beta-hemolytickej A. Táto skupina vytvára dva exotoxíny s hemolytickú aktivitu hovory streptolysins "S" a "O" ,

Streptolyzín S je zodpovedný za beta hemolýzu, ktorá sa vyskytuje v krvnom agare, a hoci je toxický pre určité bunky imunitného systému, nie je antigénny. Zatiaľ čo streptolyzín O, ktorý je labilný voči kyslíku, je zodpovedný za hemolýzu, ktorá sa vyskytuje pod krvným agarom, čo je antigénne.

Streptococcus pyogenes / Schéma toho, čo sa deje v ASTO teste (aglutinačná reakcia). (Protilátky viazané na latexové častice, ktoré obsahujú špecifický antigén). Zdroj: Užívateľ: Graham Beards / Alejandro Porto

Preto, keď bunky imunitného systému interagujú so streptolyzínom O, vzniká špecifická imunitná reakcia, ktorá generuje aktiváciu lymfocytov B. Tieto bunky produkujú protilátky namierené proti streptolyzínu O. Protilátky sa preto nazývajú antistreptolyzín O.

Streptococcus pyogenes spôsobuje rôzne patológie, medzi ktoré patria: angína, erysipel, impetigo, puerperálna horúčka, šarlach a septikémia. Anti-streptolyzínové O protilátky sa objavujú 8 až 30 dní po začiatku infekcie.

Väčšina z týchto infekcií je v populácii veľmi častá, takže je bežné, že ľudia majú vo svojej krvi antistreptolyzínové O protilátky. Nízke titre znamenajú predchádzajúcu infekciu touto baktériou, ale vysoký alebo stúpajúci titer označuje nedávnu alebo prebiehajúcu infekciu.

Kvantifikácia antistreptolyzínových O protilátok

V laboratóriu sa titer protilátok proti streptolyzínu "O" môže merať sérologickým testom. Test antistreptolyzínu O (ASTO) je založený na aglutinačnej reakcii s latexom.

Môže sa to robiť semikvantitatívne, podávanie správ krížením alebo sa môže kvantifikovať titer. Je normálne a nevýznamné nájsť hodnoty až do 200 IU / ml alebo Todd jednotiek / ml. Nad touto hodnotou sa považuje za pozitívny a klinicky významný.

Tento test nevyžaduje, aby sa pacient postil. Sérum sa používa ako vzorka, to znamená, že krv pacienta sa odoberie a umiestni do skúmavky bez antikoagulantu, potom sa odstredí, aby sa získalo sérum.

Základy techniky ASTO

Táto technika využíva latexové častice ako podporu na fixáciu antigénu streptolyzínu O. Absorbované antigénové častice reagujú so sérom pacienta. Ak má pacient antistreptolyzín O protilátku, bude sa viazať na antigén pripojený k latexovej častici.

Táto väzba spôsobuje aglutináciu, ktorá je makroskopicky viditeľná. Intenzita reakcie je priamo úmerná koncentrácii prítomných protilátok.

techniky

- semikvantitatívna technika

Intenzita reakcie môže byť semikvantifikovaná krížením. Za týmto účelom sa odoberie a umiestni sérologická platnička:

50 ul séra a 50 ul činidla ASTO. Dobre premiešajte dreveným špáradlom a vložte do automatického mixéra na 2 minúty. Pozorovať. Ak automatický rotátor nie je k dispozícii, musí sa vykonať ručne.

interpretácia

Pozastavenie bez hrudiek (jednotné): negatívne

1. + = slabá reakcia

2. ++ = mierna reakcia

3. +++ = mierna reakcia

4. ++++ = silná reakcia

Séra, ktoré sú pozitívne s 3 a 4 kríženiami, sa dajú kvantifikovať.

- Kvantitatívna technika

S cieľom kvantifikovať titer sa urobia sériové riedenia 1: 2, 1: 4: 1: 8, 1:16.

Postupujte nasledovne: Odoberú sa 4 skúmavky alebo Kahnove skúmavky a na všetky sa umiestni 0,5 ml fyziologického roztoku. Potom sa do prvej skúmavky pridá 0,5 ml séra pacienta. Dobre sa mieša. Táto skúmavka zodpovedá zriedeniu 1: 2.

Následne sa 0,5 ml prenesie do skúmavky 2 a dobre sa premieša. Táto skúmavka zodpovedá zriedeniu 1: 4 atď., Až kým sa nedosiahne požadované riedenie.

Odoberte 50 µl každého riedenia a reagujte s 50 µl činidla ASTO na aglutinačnej platni, ako je vysvetlené v semikvantitatívnej technike.

interpretácia

Zohľadňuje sa najvyššie riedenie, pri ktorom sa pozoruje viditeľná aglutinácia. Výpočty sa vykonávajú takto:

ASTO = inverzia najvyššieho pozitívneho riedenia x citlivosť techniky (konštanta).

Príklad: Pacient s pozitívnou reakciou do 1: 8

ASTO = 8 x 200 IU / ml = 1600 IU / ml alebo Toddove jednotky / ml.

Referenčná hodnota

Normálny dospelý: do 200 IU / ml

Normálne deti: do 400 IU / ml

odporúčanie

Odporúča sa namontovať pozitívnu a negatívnu kontrolu s pacientmi, aby sa zabezpečilo, že činidlo je v optimálnom stave. Ak pozitívna kontrola nie je aglutinovaná alebo negatívna kontrola aglutinuje, činidlo sa nemôže použiť.

Reakcia sa musí interpretovať po 2 minútach, po tomto čase nie je platná, ak dôjde k aglutinácii. To sú falošné poplachy.

Hyperlipemické séra interferujú s reakciou. Môžu dať falošné pocity.

Samostatná hodnota ASTO nie je veľmi užitočná. Musí to byť sprevádzané symptómami.

Okrem toho sa odporúča vykonať najmenej dve merania ASTO v prípade podozrenia na reumatickú horúčku alebo post-streptokokovú glomerulonefritídu, aby sa preukázalo zvýšenie hladín antistreptolyzínu O, a tým sa potvrdila diagnóza.

Patológie s vysokými titrami antistreptolyzínu O

Anti-streptolyzínové protilátky sa zvyšujú po infekcii Streptococcus pyogenes alebo ß-hemolytickej infekcii Streptococcus skupiny A.

Medzi ne patrí: akútna faryngitída, šarlach, impetigo, erysipel, puerperálna horúčka a septikémia.

U niektorých pacientov, ktorí trpeli nedávnymi alebo opakujúcimi sa streptokokovými infekciami, sa môžu vyvinúť autoimunitné choroby ako následok alebo komplikácia post-streptokokovej infekcie, ako je akútna glomerulonefritída a reumatická horúčka.

Post streptokokové autoimunitné ochorenia

Reumatická horúčka

Je to zápalová komplikácia alebo následky, ktoré sa môžu objaviť 1 až 5 týždňov po streptokokovej infekcii. Titre antistreptolyzínu O sa významne zvyšujú 4 až 5 týždňov po nástupe choroby.

Diagnóza vedie vysoký titer ASTO, ale nesúvisí so závažnosťou ochorenia a jeho zníženie neznamená zlepšenie.

Protilátky antistreptolyzínu O krížovo reagujú proti kolagénu a svalovým vláknam a ovplyvňujú určité orgány (okrem iného srdce, kožu, kĺby a nervový systém).

Táto komplikácia alebo následky sa vyskytujú pri srdcovom postihnutí, horúčke, nevoľnosti, nezmyslovej migračnej polyartritíde, chorea atď.

Akútna glomerulonefritída

Akútna glomerulonefritída je nezmyslený následok, ktorý sa vyskytuje v dôsledku ukladania komplexov antigén-protilátka na glomerulárnej bazálnej membráne.

Tvorba a cirkulácia komplexov antigén-protilátka (ag-ac) generovaných streptokokovými infekciami môže viesť k exsudatívnym zmenám a zápalom glomerúl s proteinúriou a hematúriou.

Tieto ag-ac komplexy sú uložené v glomerule a aktivujú komplementovú kaskádu, čo vedie k poškodeniu glomerulárneho endotelu. Z tohto dôvodu sa považuje za autoimunitné ochorenie, pretože imunitný systém jednotlivca poškodzuje svoje vlastné tkanivá.

Protilátky antistreptolyzínu O sú veľmi vysoké a hladiny komplementu sú nízke.

Referencie

1. Wiener Laboratories. Latex ASO. 2000. Dostupné na: wiener-lab.com.ar
2. Prispievatelia Wikipedia. "Anti-streptolyzín O." Wikipedia, slobodná encyklopédia. Wikipedia, The Encyclopedia, 23. január 2019. Web. 19. júl 2019.
3. Kotby A, Habeeb N, Ezz S. Antistreptolyzínový titer O v zdraví a chorobe: úrovne a význam. Pediatr Rep. 2012; 4 (1): e8. K dispozícii na adrese: ncbi.nlm.nih
4. Sen E, Ramanan A. Ako používať antistreptolyzínový titer. Pract. Arch Dis Child Educ. 99 (6): 231-8. K dispozícii na adrese: ncbi.nlm.nih
5. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologická diagnostika. (5. vydanie). Argentina, Editorial Panamericana SA
6. González M, González N. 2011. Manuál lekárskej mikrobiológie. 2. vydanie, Venezuela: Riaditeľstvo médií a publikácií University of Carabobo.