ČO JE TO JEDNODUCHÉ FARBENIE? VYNIKAJÚCE VLASTNOSTI - BIOLÓGIE - 2026

Jediný farbenie je farbenie postup rýchle a jednoduché, v ktorom je použitý jediný farbivo, takže sa nazýva jednoduché. Používa sa hlavne na určenie morfológie a organizácie buniek prítomných vo vzorke.

Bunky sú prirodzene bezfarebné, takže pri pohľade pod mikroskopom je potrebné ich zviditeľniť.

Ľudské lícne bunky farbené jednoduchým farbením metylénovou modrou.

Je dôležité si uvedomiť, že farbivá používané pri jednoduchom farbení musia byť zásadité s kladným nábojom (katiónovým), aby sa mohli spontánne viazať na bunkovú stenu a cytoplazmu.

Tieto bunkové štruktúry sú záporne nabité. Preto je pozitívne nabité farbivo priťahované k bunkám a viaže sa na ne spontánne. Všetky bunky prítomné vo vzorke sú teda rýchlo zafarbené.

Farbivá používané v jednoduchom farbení

V mikrobiologickom laboratóriu sa dá použiť niekoľko základných škvŕn. Najpoužívanejšie sú:

- Metylénová modrá.

- Crystal violet.

- Malachitová zelená.

- Základný fuchsín.

Všetky tieto farbivá dobre fungujú v baktériách, pretože majú kladne nabité (katiónové) farebné ióny (chromofory).

Časy zafarbenia pre väčšinu z týchto škvŕn sú relatívne krátke. Zvyčajne sa pohybujú od 30 sekúnd do 2 minút, v závislosti od afinity farbiva.

Je dôležité mať na pamäti, že pred zafarbením vzorky jednoduchým zafarbením musí byť vzorka natiahnutá a pripevnená k sklenenému sklíčku (sklíčku); predĺžená a pevná vzorka sa nazýva náter.

6 krokov k jednoduchému farbeniu

Krok 1

Umiestnite podložné sklíčko na stojan na farbenie a naneste požadované škvrny. Nechajte pôsobiť zodpovedajúci čas.

Zvyčajne jednoduché farbenie trvá niekoľko sekúnd až pár minút, v závislosti od použitej škvrny.

pozorovanie

V tomto kroku je dôležité neprekročiť odporúčaný čas pre použité farbivo, pretože na hárku sa môžu tvoriť kryštály, čím vznikajú tzv. Artefakty, ktoré deformujú morfológiu buniek.

Krok 2

Náter zo sklíčka dôkladne umyte destilovanou vodou z fľaše alebo pomaly tečúcou vodou z vodovodu, až kým nebude odtok číry. Zvyčajne to trvá 5 - 10 sekúnd.

pozorovanie

Neaplikujte prúd vody priamo na náter, aby nedošlo k poškodeniu vzorky.

Ak nemáte destilovanú vodu, môžete bez problémov používať vodu z vodovodu, pretože to nebude mať vplyv na výsledok zafarbenia.

Krok 3

Posuňte sklíčko savými papierovými uterákmi v jednom smere a bez trenia. Uistite sa, že spodná strana posúvača je čistá.

Krok 4

Pozorujte zafarbenú škvrnu pod mikroskopom. Začnite s najvzdialenejšími cieľmi, aby ste správne lokalizovali oblasť, ktorú chcete pozorovať. Zmeňte cieľ a priblížte sa k vzorke.

pozorovanie

Na použitie objektívu s vyšším zväčšením (zvyčajne 100x) by sa mal použiť ponorný olej, pretože to pomáha lepšiemu prieniku svetla a ostrejšiemu obrazu. Nie je potrebné používať kryciu sklíčko.

Krok 5

Nakoniec všetky vzorky zlikvidujte vo vhodnom obale, ktorý je správne označený ako „biologické nebezpečenstvo“.

Referencie

1. (2001). Mikrobiologické Použitie: Laboratory Manuál General Microbiology (8. ^th ed.). Spoločnosti McGraw-Hill.
2. Harisha, S. (2006). Úvod do praktickej biotechnológie (1. ^ročník ). Firewall Media.
3. Moyes, RB, Reynolds, J. & Breakwell, DP (2009). Predbežné farbenie baktérií: Jednoduché farbenie. Aktuálne protokoly v mikrobiológii (SUPPL. 15), 1-5.
4. Pommerville, J. (2013). Alcamo Základy mikrobiologického laboratória (10 ^th ). Jones & Bartlett Learning.
5. Prescott, H. (2002). Laboratórne cvičenie v Microbiology (5 ^th ). Spoločnosti McGraw-Hill.
6. Sumbali, G. & Mehrotra, R. (2009). Princípy mikrobiológie (1. ^st. ). Tata McGraw-Hill Education.