SELEKTÍVNE KULTIVAČNÉ MÉDIÁ: ZÁKLAD, PEVNÝ A TEKUTÝ - BIOLÓGIE

Tieto selektívne kultivačné médiá sú bujóny a agarov tie, ktoré slúžia na izoláciu definovanú skupinu mikroorganizmov, zatiaľ čo inhibícia rozvoja ostatných. Sú ideálne na siatie polymikrobiálnych vzoriek, čo umožňuje získať patogén z sprievodnej mikrobioty.

Medzi pevnými látkami a tekutinami existuje veľké množstvo selektívnych médií. Niektoré sú určené na izoláciu grampozitívnych baktérií, ako sú koaguláza pozitívne Staphylococcus, Lactobacillus, Bifidobacteria, atď.

Selektívne kultivačné médiá. Zdroj: Air1404

Iné na získanie gramnegatívnych patogénov, ako sú napríklad druhy rodov Salmonella, Shigella, Vibrio, Bordetella, Brucella, Pseudomonas.

Rovnako ako sú tu tie, ktoré uprednostňujú rast húb a kvasiniek, ako sú napríklad druhy Candida, Histoplasma, Cryptococcus, dermatofyty.

Malo by sa poznamenať, že niektoré neselektívne obohatené médiá sa môžu stať selektívnymi s pridaním antibiotík. Podobne môžu byť niektoré kultivačné médiá súčasne selektívne a diferencované.

Na druhej strane existujú selektívne tekuté kultivačné médiá; niektoré môžu slúžiť ako obohacovacie médiá, pričom uprednostňujú exacerbáciu selektívnej skupiny baktérií, zatiaľ čo iné potlačujú.

Selektívne kultivačné médiá sa široko používajú v mikrobiologických laboratóriách na analýzu rôznych typov vzoriek; ako aj na izoláciu veľkého množstva mikroorganizmov v klinickom, priemyselnom, environmentálnom a potravinovom záujme.

základ

Selektívne kultivačné médiá sú založené na tom, že obsahujú výživné látky, ktoré podporujú rast konkrétnej baktérie alebo huby alebo ich určitej skupiny, a zároveň musia obsahovať inhibičné látky, ktoré neumožňujú rozvoj iných nežiaducich mikroorganizmov.

Medzi výživové látky, ktoré môžu obsahovať, patria: pankreatický výluh kazeínu, kvasnicový extrakt, polypeptony.

Inhibítory zahŕňajú: antibiotiká, žlčové soli, svetlozelenú, kryštalickú fialovú, zásaditý fuchsín, eozín, metylénovú modrú, deoxycholát sodný, siričitan sodný, sorbitanmonoleát, citrát amónny, cetrimid, chlorid lítny, telurit draselný , malachitová zelená.

Médiá môžu byť niekedy selektívne aj diferencované. Podobne sa stupeň selektivity líši od jedného média k druhému.

Niektoré z nich sú vysoko selektívne, vyznačujú sa extrémnymi nepriateľskými podmienkami pre väčšinu mikroorganizmov, v ktorých iba malé množstvo druhov je schopných odolať podmienkam prítomným v životnom prostredí, a preto uspokojivo rastú. Napríklad agar TCBS a agar MRS.

Zatiaľ čo iné sú mierne selektívne, to znamená tie, ktoré inhibujú špecifickú skupinu mikroorganizmov, ako sú grampozitívne baktérie. Na druhej strane uprednostňujú rast veľkého množstva gramnegatívnych baktérií; napríklad agar Mac Conkey.

Nakoniec existujú kultivačné médiá s nízkou selektívnou silou, to znamená, že sú to také, ktoré umožňujú rast veľkého množstva baktérií medzi grampozitívnymi a grampozitívnymi negatívnymi, ako aj niektoré kvasinky, zatiaľ čo inhibujú iba malú skupinu mikroorganizmov. Príklad: EMB agar.

Selektívne médiá s pevnou kultúrou

Baird-Parkerov agar

Médium určené na detekciu koagulázovo pozitívnych stafylokokov (Staphylococcus aureus). Obsahuje ako inhibičné látky chlorid lítny a telurit draselný.

Agar BCYE alebo agar s extraktom z aktívneho uhlia z kvasiniek

Je to vysoko obohatené kultivačné médium, najmä na izoláciu druhov Legionella a Nocardia. Toto médium sa stáva selektívnym pridaním antimikrobiálnych látok, ako je polymyxín B, vankomycín a anisomycín.

BHI agar s antibiotikami

Agar BHI je pôvodne obohateným médiom, ale ak sa pridajú chloramfenikol a cykloheximid, je ideálny na selektívnu izoláciu húb klinického významu.

VEĽKÝ agar

Selektívne a diferenciálne médium na izoláciu druhov Candida. Obsahuje citrát amónny, bizmut a siričitan sodný, ktoré pôsobia ako inhibítory rastu baktérií.

Agar Bordet Gengou

Obohatené a selektívne kultivačné médium, najmä na izoláciu B. ordetella pertussis a Bordetella parapertussis. Obsahuje cefalexín, ktorý inhibuje sprievodnú flóru.

Campy agar s krvou

Médium použité na izoláciu rodu Campylobacter. Obsahuje cefoperazón, vankomycín a amfotericín B na inhibíciu rastu gramnegatívnych, grampozitívnych baktérií a húb.

Agar Campylobacter Butzler

Špeciálne médium na izoláciu druhov rodu Campylobacter. Je doplnená koňskou krvou, okrem iných výživných látok. Obsahuje tiež rôzne inhibičné látky, ako je novobiocín, kolistín, cefazolin, bacitracín a cykloheximid.

Campylobacter Skirrow Agar

Selektívne médium na izoláciu druhov Campylobacter. Obsahuje konskú krv a ďalšie živiny. Ako inhibičné látky obsahuje vankomycín, polymyxín B a trimetoprim.

CCF agar alebo fruktózový agar, cykloserín, cefoxitín

Ako už názov napovedá, obsahuje cykloserín a cefoxitín ako inhibičné látky a používa sa na izoláciu Clostridium diffcile vo vzorkách stolice, okrem iných črevných vzoriek.

Agar cetrimidu

Selektívne médium určené na izoláciu Pseudomonas aeruginosa, ktoré podporuje výrobu pigmentov. Cetrimid (cetyltrimetylamóniumbromid) je látka, ktorá inhibuje rast baktérií iných ako P. aeruginosa.

Čokoládový agar s izovitalexom a vankomycínom

Toto médium je pôvodne veľmi obohatené. Pridanie vankomycínu je užitočné na selektívnu izoláciu kmeňov Neisseria gonorrhoeae a N. meningitidis.

Agar CIN alebo cefsulodínový agar, irgasan, novobiocín

Je to mierne selektívne kultivačné médium na izoláciu druhov Yersinia.

Agar CNA (kolistín, kyselina nalidixová)

Je to špeciálne selektívne médium na izoláciu grampozitívnych baktérií, ako sú Staphylococcus, Enterococcus, Streptococcus a kvasinky, ale inhibuje rozvoj gramnegatívnych baktérií, ako sú Pseudomonas a druhy z čeľade Enterobacteriaceae.

Czapekov agar

Médium určené na kultiváciu saprofytických baktérií a húb. Toto médium obsahuje anorganický dusík. Z tohto dôvodu sa toto médium považuje za selektívne, pretože sa môžu vyvíjať iba mikroorganizmy schopné používať anorganické zlúčeniny ako jediný zdroj dusíka.

EMB agar

Mierne selektívne a diferenciálne médium, ktoré sa používa na izoláciu Enterobacteriaceae. Escherichia coli je na tomto médiu detegovaná najmä lesklou zeleno-čiernou farbou svojich kolónií. Stupeň selektivity, ktorý vykazuje, je spôsobený prítomnosťou anilínových farbív (eozínová a metylénová modrá).

Endo agar

Minimálne selektívne a diferencované médium, ktoré sa používa na izoláciu a diferenciáciu fermentujúcich a nefermentujúcich laktátových gramnegatívnych baktérií patriacich do čeľade Enterobacteriaceae a do iných rodín.

Siričitan sodný a zásaditý fuchsín inhibujú väčšinu grampozitívnych baktérií. Escherichia coli na tomto médiu vytvára charakteristické tmavočervené kolónie s dúhovým zelenkavým kovovým leskom.

Hektoenov agar

Selektívne a diferenciálne médium na izoláciu enteropatogénnych baktérií rodov Shigella a Salmonella. Ako inhibičná látka obsahuje žlčové soli, ktoré potláčajú rozvoj grampozitívnych a niektorých gramnegatívnych baktérií.

Löwenstein-Jensenov agar

Médium špeciálne navrhnuté na izoláciu a vývoj baktérií rodu Mycobacterium, najmä druhov tuberkulózy.

Médium obsahuje malachitovú zeleň; Táto látka inhibuje sprievodnú grampozitívnu a grampozitívnu flóru, ktoré boli schopné odolávať predchádzajúcej dezinfekcii vzorky. Obsahuje tiež glycerín, ktorý stimuluje rast M. tuberculosis, ale inhibuje rast M. bovis a ďalších mikroorganizmov.

Mac Conkey agar

Je to selektívne a diferenciálne médium. Používa sa na izoláciu laktózových necitlivých, fermentujúcich a nefermentujúcich gramnegatívnych tyčiniek.

Jeho selektívny charakter je zabezpečený prítomnosťou žlčových solí a kryštalickej fialovej. Tieto látky inhibujú rast grampozitívnych baktérií a niektorých náročných gramnegatívnych tyčiniek.

Agar so slaným manitolom

Selektívny a diferenciálny agar na izoláciu Staphylococcus aureus. Toto médium má vysokú koncentráciu chloridu sodného, ktorý inhibuje rast väčšiny baktérií.

Agar SS

Mierne selektívne a diferenciálne médium na izoláciu rodov Salmonella a Shigella. Médium obsahuje inhibičné látky, ako sú žlčové soli, citran sodný a svetlo zelená. Tieto látky potláčajú rast grampozitívnych baktérií, určitých gramnegatívnych baktérií a niektorých koliformných baktérií.

Regan Lowe Agar

Selektívny agar na izoláciu Bordetella pertussis. Médium obsahuje uhlie, cefalexín a amfotericín B ako inhibičné látky.

Agar SABHI

Selektívne médium na izoláciu patogénnych húb, ako sú dermatofyty, Blastomyces dermatitidis a Histoplasma capsulatum. Obsahuje chloramfenikol.

Krvný agar s bacitracínom

Špeciálne médium na izoláciu Haemophilus influenzae. Bacitracín inhibuje sprievodnú flóru.

Agar na uhlí z krvi koní

Selektívne médium užitočné na získanie kmeňov Bordetella pertussis a B. parapertussis z klinických vzoriek. Obsahuje cefalexín, ktorý inhibuje sprievodnú flóru.

Krvný agát kanamycín-vankomycín (KV)

Selektívne médium, špeciálne na izoláciu anaeróbnych baktérií, ako sú Bacteroides, Prevotella, Fusobacterium a Veillonella.

Agar s obsahom bizmutu

Selektívne médium na izoláciu Salmonella enterica podskupiny enterica sérotyp Typhi. Toto médium obsahuje jasne zelený siričitan bizmutitý, ktorý inhibuje rast grampozitívnych mikroorganizmov a určitých gramnegatívnych baktérií.

Agar TCBS (tiosíran, citrát, žlčové soli)

Vysoko selektívne médium na izoláciu druhov rodu Vibrio. Obsahuje citrát sodný, oxímovú žlč a zásadité pH, ktoré inhibuje sprievodnú flóru.

Thayer-Martinov agar

Vysoko výživné a selektívne médium na izoláciu Neisseria meningitidis a Neisseria gonorrhoeae. Sprievodná flóra je inhibovaná prítomnosťou vankomycínu, kolistínu a nystatínu.

Žiarivo zelený agar

Selektívne médium na izoláciu kmeňov rodu Salmonella. Ako už názov napovedá, obsahuje ako inhibičnú látku jasne zelenú farbu. To bráni rastu grampozitívnych baktérií a veľkého počtu gramnegatívnych mikroorganizmov.

Agar Vogel-Johnson

Je to selektívne a diferenciálne kultivačné médium, pripravené na izoláciu Staphylococcus aureus a inhibuje rast gramnegatívnych baktérií a dokonca aj niektorých grampozitívnych baktérií. Inhibujúce látky sú telurit draselný, chlorid lítny a glycín.

Agar XLD

Je to selektívne a diferenciálne médium na izoláciu enteropatogénov Salmonella a Shigella. Deoxycholát sodný dáva médiu selektívny charakter.

CHROMagar (médium Candida)

Je to selektívne a diferenciálne médium, ktoré pomáha pri izolácii a identifikácii druhov Candida. Médium obsahuje chloramfenikol, ktorý inhibuje rast baktérií.

Middle Ellinghausen McCulough Johnson and Harris (EMJH)

Selektívne médium na kultiváciu leptospír. Obsahuje polysorbát 80, ktorý inhibuje rast väčšiny baktérií.

Selektívne tekuté kultivačné médiá

BHI bujón NaCL 6,5%

Selektívny vývar na regeneráciu Enterococcus. Vysoká koncentrácia chloridu sodného inhibuje rast sprievodnej mikrobioty.

EC vývar

Selektívny vývar na regeneráciu celkových a fekálnych koliformných baktérií. Obsahuje žlčové soli, ktoré inhibujú rast iných mikroorganizmov.

GN vývar

Selektívny vývar na regeneráciu salmonely a shigely. Obsahuje citrát sodný a deoxycholát sodný, ktoré inhibujú grampozitívne baktérie a koliformné baktérie.

Vývar Rappaport-Vassiliadis

Je to selektívne obohacovacie médium pre druhy Salmonella. Obsahuje malachitovú zeleň ako inhibičnú látku.

Selenitový vývar

Je to selektívne kultivačné médium užitočné na obohatenie vzoriek, u ktorých existuje podozrenie na prítomnosť enteropatogénnych baktérií rodu Salmonella.

Ako už názov napovedá, obsahuje seleničitan sodný ako inhibičnú látku, ktorá potláča rast grampozitívnych baktérií a väčšiny baktérií v gastrointestinálnom trakte.

Tetrathionátový vývar

Selektívny vývar na obohatenie a regeneráciu kmeňov rodu Salmonella.

Tetrathionát tvorený reakciou generovanou medzi tiosíranom sodným a jódovaným roztokom prítomným v médiu inhibuje rast koliformných baktérií a podporuje vývoj baktérií, ktoré obsahujú enzým tetrathionát reduktázu (Salmonella).

Obsahuje tiež žlčové soli a niektoré odrody zahŕňajú jasne zelenú; obe látky inhibujú najviac grampozitívne a niektoré gramnegatívne baktérie (koliformné formy).

Campy tioglykolátový bujón

Špeciálny bujón na podporu rozvoja C. jejuni subsp jejuni. Obsahuje amfotericín B, cefalotín, polymyxín B, trimetropim a vankomycín.

Vývar Todd-Hewitt s krvou a antibiotikami

Slúži na obohatenie vzoriek a podporuje vývoj Streptococcus agalactiae z vaginálnych sekrétov. Ako inhibičné látky obsahuje kyselinu nalidixovú a gentamicín alebo kolistín.

Referencie

Média pre klinickú mikrobiologickú kultiváciu (akademický rok 2012 - 2013). K dispozícii na adrese: asignatura.us.es
Laboratóriá BD. Campylobacter Skirrow Agar a Campylobacter Butzler Agar. 2013. K dispozícii na: bd.com
Laboratóriá IVD. Löwenstein-Jensen. 2011. Dostupné na: bio-rad.com
Neogen Laboratories. GN vývar (Hajna). K dispozícii na adrese: foodsafety.neogen.com
Laboratóriá BD. CHROMagar. Candida Medium 2014. Dostupné na: bd.com
Laboratóriá BD. Vývar Rappaport Vassiliadis. 2003. K dispozícii na: bd.com
Webový portál Lifeder.com. K dispozícii na adrese: Lifeder.com
Laboratóriá BD. Leptospira Medium Base EMJH2011 K dispozícii na adrese: http://legacy.bd.com
Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologická diagnostika. 5. vydanie. Editorial Panamericana SA Argentína.
Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey a Scott Mikrobiologická diagnostika. 12 ed. Editorial Panamericana SA Argentína.

SELEKTÍVNE KULTIVAČNÉ MÉDIÁ: ZÁKLAD, PEVNÝ A TEKUTÝ - BIOLÓGIE - 2026