OBOHATENÉ KULTIVAČNÉ MÉDIUM: VLASTNOSTI, TYPY, POUŽITIA - BIOLÓGIE - 2025

Obohatená kultivačné médium sa skladá z kombinácie živného agaru ako základ plus obohatené látky alebo zlúčeniny. Obohatenými médiami par excellence sú krvný agar a čokoládový agar.

Obidve médiá sa môžu pripraviť s jednoduchým základom akéhokoľvek živného agaru, ako je napríklad živný agar, sójový agar trypticaseínu alebo agar infúzie srdca a srdca. Obidve médiá sú tiež doplnené vysoko obohateným prvkom, ktorým je krv, s tým rozdielom, že v prvom prípade sa používa defibrinovaná a v druhom prípade sa zahrieva.

Dve misky s krvným agarom (obohatené kultivačné médium) vykazujúce beta-hemolýzu. Zdroj: Pixabay.com

Tieto médiá neobsahujú inhibítory, takže na nich môže rásť široká škála mikroorganizmov, vrátane niektorých nutrične náročných kmeňov. V prípadoch, ktoré sú už mimoriadne náročné, vyžadujú okrem krvi ďalšie špeciálne výživové doplnkové látky, ktoré sa musia pridávať do média, v ktorom sa má izolovať.

Na druhej strane, ak sa do obohateného média pridajú antibiotiká alebo iné inhibičné látky, okamžite sa stane selektívnym obohateným médiom. Posledne menované sú potrebné pri izolácii vysoko náročných mikroorganizmov z oblasti bohatej na mikrobiotu, ako je napríklad Haemophilus sp a Neisseria meningitidis izolovaná zo vzorky výtoku z nosohltanu.

vlastnosti

Tieto médiá majú výživový základ pozostávajúci okrem iného z peptonov, kvasnicových extraktov, pankreatického trávenia a niekedy aj glukózy. Obsahuje tiež látky, ktoré vyrovnávajú pH, vodu a agar-agar.

Na druhej strane je možné pridať defibrinovanú alebo zahrievanú krv a následne môžu byť zahrnuté špecifické rastové faktory, ako sú: vitamínové komplexy, biotín, kyselina para-aminobenzoová, hemín, NAD.

Rozdiely medzi kultivačnými médiami a obohacovacími médiami

Dôležité je, že obohatené kultivačné médiá by sa nemali zamieňať s obohacujúcimi médiami. Aj keď obe obsahujú výživné látky a špeciálne výživové požiadavky, obohacovacie médiá sú tekuté a používajú sa na predúpravu vzoriek, pri ktorých existuje podozrenie na prítomnosť určitého typu patogénnych baktérií, ktoré sa nachádzajú v menšej miere v rámci polymikrobiálnej zmesi.

Obohacovacie médium bude inhibovať mikroorganizmy, ktoré nepatria do tejto skupiny, a bude podporovať rast patogénu.

Okrem toho majú tú vlastnosť, že opravujú poškodenie prítomné na bunkovej štruktúre mikroorganizmu, ktorý sa má regenerovať, pretože to môže byť normálne ovplyvnené predchádzajúcimi ošetreniami, ktoré sú v tomto smere ovplyvnené, a v tomto zmysle médium pôsobí tak, že zvyšuje svoju životaschopnosť.

Obohatené typy a použitie agaru

Najpoužívanejším obohateným agarom je krvný agar, ktorý sa však môže pripraviť s rôznymi výživovými základmi a podľa toho sa mení jeho užitočnosť.

Na druhej strane existuje aj čokoládový agar, ktorý je obohateným médiom par excellence. Rovnako ako krvný agar sa však môže pripraviť s rôznymi výživovými základmi, okrem iných prísad na izoláciu náročných mikroorganizmov.

Nižšie je uvedený prehľad najpoužívanejších agarových báz na prípravu krvného a čokoládového agaru, ako aj ich užitočnosť v každom prípade.

- Krvný agar

Kultúra na krvnom agare fakultatívnej anaeróbnej baktérie Morganella morganii. Prevzaté a upravené: Baktérie na fotografiách.

Pripravený s:

Dno živného agaru

Používa sa okrem iných aj pre nenáročné baktérie: Enterobacteriaceae, Pseudomonas sp, S. aureus, Bacillus sp. Nie je vhodný pre náročné baktérie ako Streptococcus.

Základ agaru s infúznym mozgovým srdcom

Krvný agar s touto bázou je vynikajúci pre väčšinu baktérií, vrátane Streptococcus sp, ale neodporúča sa na sledovanie hemolýzy. Táto kombinácia s určitými prísadami je užitočná pre určité mikroorganizmy. Príklady:

Ak sa do tohto média pridá cystín a glukóza, používa sa na izoláciu Francisella tularensis. Zatiaľ čo v prípade, že sa pridá cystín tellurit, je užitočné izolovať Corynebacterium diphteriae.

Podobne sa toto médium používa na izoláciu baktérií rodu Haemophilus, ale v tomto prípade je potrebné pridanie bacitracínu, kukuričného škrobu, konskej krvi a ďalších doplnkov na obohatenie, ako je (IsoVitaleX).

Nakoniec, ak je obsiahnutý v jeho príprave (chloramfenikol - gentamicín) alebo (penicilín - streptomycín) s koňskou krvou, je ideálny na izoláciu Histoplasma capsulatum.

Tryptikáza na sójovom agare

Je vynikajúci na podporu rastu širokého spektra mikroorganizmov, vrátane Streptococcus sp, čo je najviac odporúčané na pozorovanie hemolytických schém.

Ak je doplnený o cystín tellurit a jahňaciu krv, je ideálny pre Corynebacterium diphteriae.

Základňa agaru Müeller Hinton

Ideálne pre antibiogramy komplikovaných mikroorganizmov, ako je Streptococcus sp, ako aj pre izoláciu Legionella pneumophila.

Thayer Martin Agar Base

Je ideálny na izoláciu druhov Neisseria meningitidis.

Columbia agarová základňa

Je špeciálny na izoláciu Helicobacter pylori a Gardnerella vaginalis. Pre väčší úspech sa pridávajú rôzne typy antibiotík, ktoré inhibujú sprievodnú mikrobiotu.

Brucella agarová základňa

Kombinácia jahňacej krvi, vitamínu K a agaru Brucella je vynikajúca na pestovanie anaeróbnych baktérií.

Agarový základ Campylobacter

Ako už názov napovedá, táto báza sa používa na izoláciu Campylobacter jejuni vo vzorkách stolice. Na tento účel je doplnený 5% ovčej krvi a cefaloteínom, amfotericínom B, trimetoprimom, polymyxínom B a vankomycínom.

- Čokoládový agar

Čokoládový agar

Pripravený s:

Columbia agarová základňa

Príprava čokoládového agaru s týmto základom sa široko používa na izoláciu baktérií rodu Neisseria.

Odporúča sa tiež na izoláciu Brucella sp, ale na tento účel sa musí pridať vitamín K a musí sa použiť konská krv.

GC základný agarový základ

Je jedným z odporúčaných základov na výrobu čokoládového agaru, najmä na izoláciu gonokokov.

Základňa agaru Müeller Hinton

Niektoré náročné mikroorganizmy, ako napríklad Streptococcus pneumoniae, vyžadujú, aby bolo toto médium schopné vykonať test antimikrobiálnej citlivosti.

Je tiež užitočný pri izolácii Neisserias a Haemophilus, s výnimkou toho, že rod Haemophilus preferuje konskú krv, pretože je bohatý na faktor X (hemin) a V (NAD).

Niekedy je vhodné zahrnúť do prípravy antibiotiká, aby sa inhibovala sprievodná mikrobiota.

Základňa s agérom Thayer Martin

Na prípravu čokoládového agaru s týmto základom sa odporúča použitie jahňacej krvi. Toto médium je špeciálne na izoláciu Neisseria gonorrhoeae. Antibiotiká sa pridávajú na inhibíciu sprievodnej mikrobioty.

Čokoládový agar (obohatené kultivačné médium): Zdroj: Pixinio.com

Referencie

1. Prescott M, Harley P, Klein A. Microbiology, 4th. Editorial McGraw-Hill Interamericana, 2003, Madrid, Španielsko, str. 105-108.
2. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey a Scott Mikrobiologická diagnostika. 12 ed. Argentína. Editorial Panamericana SA
3. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologická diagnostika. (5. vydanie). Argentina, Editorial Panamericana SA
4. Jawetz E., Melnick J., Adelberg E. (1992). Lekárska mikrobiológia. ( Vydanie 14 ^ta ) Mexico, Editorial El Manual Moderno.
5. González M, González N. 2011. Manuál lekárskej mikrobiológie. 2. vydanie, Venezuela: Riaditeľstvo médií a publikácií University of Carabobo.