CARY BLAIR MEDIUM: ZDÔVODNENIE, PRÍPRAVA A POUŽITIE - BIOLÓGIE - 2025

Priemerná Cary Blair je polotuhé agar, ktorý sa používa na prepravu a uchovanie biologických vzoriek nesúcich črevných patogénov, mikroorganizmy a anaeróbne labilná. Jeho funkciou je, rovnako ako všetky dopravné prostriedky, udržiavať vzorku v optimálnych podmienkach až do kultivácie. Prítomné patogénne mikroorganizmy, ako aj sprievodné mikrobioty, musia zostať životaschopné, ale bez zvyšovania svojej populácie.

Cary Blair Medium je výsledkom zmeny zloženia transportného média Stuart. Modifikácia sa uskutočnila v roku 1964 a spočívala v nahradení systému regulujúceho pH (glycerofosfát) fosfátovaným anorganickým pufrom.

A. Kultiveta s médiom Cary Blair B. Zberač stolice s médiom Cary Blair. Zdroj: A. Video Meganhow, získajte kultúru rán 2011 youtube.com B. Používateľ: Mattes

Preformulovanie bolo nevyhnutné, pretože jeho tvorcovia si uvedomili, že glycerofosfát sa po určitej dobe mohol metabolizovať niektorými saprofytickými baktériami. Tieto sa mnohonásobne prekrývajú prítomnými patogénmi.

Ďalšími zmenami boli eliminácia metylénovej modrej, ako aj úprava pH na zásaditosť (pH 8,4). Všetky tieto zmeny zlepšili efektívnosť dopravných prostriedkov.

Pôvodne sa médium Cary Blair používalo na udržiavanie črevných patogénov, ako napríklad Shigella flexneri, Salmonella sp, Vibrio cholerae a Campylobacter sp.

Následne sa však pozorovala účinnosť pri zachovaní životaschopnosti náročných a labilných patogénov, ako sú: Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis, Bordetella pertussis, Streptococcus pneumoniae a niektoré anaeróby.

základ

Médium Cary Blair obsahuje chlorid sodný, tioglykolát sodný, fosforečnan disodný, chlorid vápenatý a agar.

Chlorid sodný udržuje osmotickú rovnováhu média, fosforečnan sodný a chlorid vápenatý rovnováhu pH. Tioglykolát sodný má nízky potenciál redukcie oxidácie, zatiaľ čo malá časť agaru poskytuje polotuhú konzistenciu.

Médium Cary Blair neobsahuje výživné látky, pretože funkciou transportného média je udržať vzorku bez toho, aby podliehala zmenám, pokiaľ ide o vlhkosť a mikrobiálne zaťaženie; to znamená, že zabraňuje dehydratácii vzorky pri zachovaní životaschopnosti a množstva prítomných mikroorganizmov.

Konečne mierne alkalické pH zabraňuje odumieraniu mikroorganizmov kyslosťou, najmä Vibrios je veľmi citlivý na kyseliny.

príprava

Médium Cary Blair je komerčne dostupné ako špeciálne zariadenie pripravené na použitie. Transportný systém je zakrytý plastovým vreckom Peel Pack. Vo vnútri obsahuje tampón na zozbieranie vzorky a nádobu na skúmavku pre polotuhé médium Cary Blaira.

Na trhu sú tiež komerčné domy, ktoré dodávajú dehydratované médium na jeho prípravu v laboratóriu.

Za týmto účelom sa odváži 13,2 g dehydratovaného média a rozpustí sa v jednom litri destilovanej vody. Zahrievajte a pretrepávajte, kým sa úplne nerozpustí. Médium sa rozdelí do skúmaviek s uzavretým uzáverom (bakelit).

Skúmavky naparujte 15 minút. Nechajte vychladnúť a až do použitia uchovávajte pri izbovej teplote.

Naočkované médium Cary Blair sa môže optimálne skladovať až 18 mesiacov pri izbovej teplote.

PH média sa musí upraviť na 8,4 ± 0,2. Farba pripraveného média je béžová s určitou opalescenciou.

použitie

Typ vzoriek

Médium Cary Blair sa používa, keď vzorky stolice, rektálne výtery a vaginálne výtery nemožno okamžite spracovať.

Ak nie je k dispozícii žiadny dopravný prostriedok, vzorky sa môžu uchovávať pri -70 ° C.

Vzorkovanie

Tampón sa impregnuje vzorkou a zavedie sa do média Cary Blair bez dosiahnutia dna.

Identifikácia vzorky

Médium Cary Blair musí mať štítok, na ktorom sú umiestnené základné údaje, ako napríklad: meno a priezvisko pacienta, identifikačné číslo vzorky, zdroj odberu vzorky, ošetrujúci lekár, dátum a čas odberu. vzorka, predpokladaná diagnostika, liečba antibiotikami.

prevod

V prípade vzoriek stolice je pevne zakrytý a prepravovaný pri izbovej teplote. Zatiaľ čo v prípade vaginálnych vzoriek pri hľadaní anaeróbnych mikroorganizmov sa odporúča prepravovať vzorky pri 4 ° C.

Vo všetkých prípadoch je odporúčaná doba prenosu 4-6 hodín, maximálne 24 hodín.

Ak existuje podozrenie na prítomnosť Campylobacter jejuni vo vzorkách stolice a tieto vzorky sa nedajú spracovať do 24 hodín, odporúča sa uchovávať v médiu Cary Blair pri 4 ° C.

Vyšetrovania na dopravnom prostriedku Cary Blair

Niekoľko štúdií ukázalo, že médium Cary Blair môže zostať životaschopné pre enteropatogénne mikroorganizmy rodu Shigella a Salmonella až 49 dní po odobratí vzorky.

Vibrio cholerae, ďalší dôležitý črevný patogén, je schopný prežiť 22 dní, zatiaľ čo Yersinia pestis (pôvodca bubonického a pneumonického moru) môže byť obnovený po 75 dňoch.

Napriek preukázanej trvanlivosti, pokiaľ ide o regeneráciu týchto mikroorganizmov, sa však odporúča, aby sa odobraté vzorky prepravili v médiu Cary Blair do laboratória čo najrýchlejšie.

Podobne, keď sa vzorka dostane do laboratória, musí sa okamžite naočkovať do príslušného kultivačného média.

Na druhej strane sa médium Cary Blair okrem toho, že je užitočné na prepravu fakultatívnych mikroorganizmov, odporúča aj pre vzorky, ktoré obsahujú anaeróbne patogény.

V tomto zmysle DeMarco a kol., V roku 2017, vykonali štúdiu s názvom: Prežitie vaginálnych mikroorganizmov v troch komerčne dostupných dopravných systémoch.

Ukázali, že transportné médium Cary Blair je najlepším transportným médiom na uchovávanie a regeneráciu vaginálnych anaeróbnych mikroorganizmov. Podobne ukázali, že najvyššia miera výťažnosti sa dosiahla, keď bola teplota prenosu 4 ° C.

Preto sa dospelo k záveru, že prepravná teplota vaginálnych výterov (anaeróbnych mikroorganizmov) by mala byť 4 ° C. Zatiaľ čo v prípade vzoriek stolice pri hľadaní fakultatívnych mikroorganizmov je ideálnou teplotou teplota miestnosti.

QA

Na vyhodnotenie kontroly kvality transportného média Cary Blair, kmeňov známych ako Shigella sonnei ATCC 11060, Salmonella choleraesuis ATCC 14028, Vibrio cholerae a Campylobacter sp.

Médium sa naočkuje vybraným kmeňom a udržuje sa pri teplote miestnosti počas 24 hodín. Potom sa vysejú do zodpovedajúcich kultivačných médií. Vo všetkých prípadoch sa očakáva uspokojivé obnovenie príslušného mikroorganizmu.

Referencie

1. DeMarco AL, Rabe LK, Austin MN, a kol. Prežitie vaginálnych mikroorganizmov v troch komerčne dostupných transportných systémoch. Anaeróbne. 2017; 45: 44–49.
2. Wasfy M, Oyofo B, Elgindy A, Churilla A. Porovnanie konzervačných médií na uchovávanie vzoriek stolice. J Clin Microbiol. devätnásť deväťdesiat päť; 33 (8): 2176-2178.
3. Dan M, Richardson J., Miliotis MD, Koornhof HJ. Porovnanie konzervačných médií a zmrazovacích podmienok na skladovanie vzoriek trusu. J Med Microbiol. 1989; 28 (2): 151-4.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologická diagnostika. 5. vydanie. Editorial Panamericana SA Argentína.
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey a Scott Mikrobiologická diagnostika. 12 ed. Editorial Panamericana SA Argentína.
6. Conda Pronadisa Laboratories. Half Cary Blair. K dispozícii na adrese: condalab.com
7. Metrix Laboratory. Cary Blair. K dispozícii na adrese: metrixlab.mx