- Nadácia a materiály
- materiály
- kroky
- Makroskopické a mikroskopické vyšetrenie
- Pôvodná technika Faust
- Faustova technika odstredením
- výhoda
- nevýhody
- Referencie
Faust metóda je metóda, ktorá umožňuje koncentráciu niektorých vajíčok a / alebo lariev parazitov obsiahnutých vo výkaloch o plávajúce. Používa sa, keď sú priame koproparazitologické testy negatívne, alebo ak chcete získať čisté vzorky bez detritu.
Koncentračné metódy pre koproparazitologické vyšetrenia sú troch typov: flotáciou, sedimentáciou alebo metódami, ktoré kombinujú predchádzajúce dva. Tieto metódy zvyšujú šance na pozitívne výsledky.

Analýza stolice.
Metóda Faust spočíva v zmiešaní časti vzorky stolice s hustejšou látkou ako vajcia alebo parazity, ktoré sa majú koncentrovať. To spôsobuje, že sú menej husté a vznášajú sa na povrchu. Kvapalina nad usadeninou sa zhromaždí a mikroskopom sa pozrie na identifikáciu a kvantifikáciu.
Táto metóda sa používa na vizualizáciu vajíčok hlíst. Zároveň sa ukázalo, že je to veľmi citlivá metóda na diagnostiku Giardia lamblia, bičovaného protozoanu, ktorý je celosvetovo rozšírený. Flotačné metódy sa neodporúčajú pre veľmi ťažké vajíčka parazitov, ako sú tasemnice a trematódy.
Paraziti sú jednou z najrozšírenejších črevných infekcií na celom svete, najmä v chudobných krajinách so zlými hygienickými opatreniami. Z tohto dôvodu je citlivé metódy na identifikáciu a kvantifikáciu týchto parazitov veľmi užitočné pre diagnostiku a liečbu.
Nadácia a materiály
Táto technika je založená na existencii rôznych špecifických hmotností vajíčok, parazitov, cýst, lariev a detritov, pričom sa ako flotačná metóda používajú roztoky síranu zinočnatého.
Dôvodom tejto techniky je zmiešanie vzorky s roztokom síranu zinočnatého, ktorý má vyššiu hustotu ako ľahšie vajcia, larvy alebo parazity.
To umožňuje vyzrážať ťažšie prvky a ľahšie vznášať sa, ktoré sa objavia v supernatante po centrifugácii vzoriek.
materiály

Kontajnery na zber vzoriek stolice (Zdroj: Bobjgalindo cez Wikimedia Commons)
- Pripravte roztok síranu zinočnatého s hustotou 1,18 alebo 1,2 g / ml, ak bola vzorka predtým ošetrená.
- Pripravte stojan s predtým označenými skúmavkami.
- Majte odstredivý stroj.
- Majte po ruke mikroskopické sklíčka a krycie sklíčka. Všetky musia byť označené
- Uistite sa, že je k dispozícii roztok Lugolu na zafarbenie listov.
- Nechajte filtrovať gázu.
- Majte lieviky a destilovanú vodu.
- Vyhľadajte označené plastové alebo kartónové obaly.
- Tiež aplikátory a sterilnú rukoväť 5 mm.
- Ľahší na sterilizáciu rukoväte.
kroky
Makroskopické a mikroskopické vyšetrenie
Pri akomkoľvek vyšetrení stolice sa vyšetrenie začína tým, čo sa nazýva „hrubé vyšetrenie“ vzoriek.
Opisuje sa konzistencia, farba, prítomnosť toho, čo sa javí ako krv, prítomnosť hlienu a prítomnosť dospelých parazitov.
Potom prejdeme na „mikroskopické vyšetrenie“ stolice, záleží to od metódy. Najjednoduchšia je metóda priameho rozmazania, ktorá je najjednoduchšou metódou mikroskopického pozorovania parazitov.

Fotografie pozorovania črevného parazita Gardia lamblia (Zdroj: Riddlemaster prostredníctvom Wikimedia Commons)
Postup spočíva v tom, že sa malé množstvo vzorky umiestni priamo na podložné sklíčko. Vložte niekoľko kvapiek fyziologického roztoku, ktorý by mal mať podobnú veľkosť ako vzorka. Soľný roztok sa mieša so stoličkou, až kým nevznikne homogénna zmes. Položte kryciu sklíčko a vyšetrte pod mikroskopom.
Pôvodná technika Faust
Druhý postup pozostáva z Faustovej floatovej metódy, ktorej pôvodná verzia pozostáva z:
1 - Na tento účel vložte asi dva gramy výkalov do vhodnej nádoby.
2. Pridajte 30 ml flotačného roztoku síranu zinočnatého, pomocou ktorého sa vytvorí emulzia zmiešaním roztoku s výkalmi.
3. Kovové sitko napnite do druhej nádoby a preneste do skúmavky.
4. Pridajte ďalší flotačný roztok, kým sa v skúmavke nevytvorí meniskus.
5. Na meniskus položte sklenenú kryciu sklíčku. Nechajte odpočívať 10 až 15 minút.
6. Odstráňte krycie sklíčko a položte ho na podložné sklíčko, ktoré bude vyšetrené pod mikroskopom.
Faustova technika odstredením
Pôvodne metóda nepoužívala odstredenie, ale teraz je zahrnutá, pretože sa dosahujú lepšie výsledky. Táto technika zahŕňa rad krokov na dosiahnutie správneho postupu, jedná sa o tieto kroky:
1 - Výkaly sa premyjú vodou, dobre sa premiešajú a potom sa filtrujú gázou zloženou na štyri. Vzorka sa umiestni do skúmavky.
2 - Centrifugujte a odstráňte supernatant (vzorky, ktoré sa udržiavajú nad vodou). Kroky 1 a 2 sa opakujú, až kým nie je supernatant „číry“.
K filtrovanej a odstredenej vzorke sa pridá síran zinočnatý.
4- To sa dobre premieša.
5 - odstreďujte znovu 1 minútu pri 2500 ot./min. (Otáčky za minútu).
6 - Supernatant sa izoluje sterilnou slučkou asi 5 mm; skúmavky by sa nemali pretrepávať.
7 - Vzorka získaná zo supernatantu sa umiestni na podložné sklíčko a kvapka Lugol sa môže umiestniť do zafarbenia, krycí sklíčko sa umiestni a pozoruje pod mikroskopom.
8- Nádoby a skúmavky sú označené.
výhoda
- Prvky použité na diagnostiku sú viditeľné čisté a bez „detritu“, čo uľahčuje pozorovanie plachty a skracuje čas potrebný na diagnostiku.
- V supernatante sa získajú larvy, vajíčka a / alebo cysty.
- Je to metóda s veľmi nízkymi nákladmi.
- Postup je veľmi jednoduchý a ľahko implementovateľný.
- Diagnóza je rýchla a presná.
- Vzhľadom na význam a vysoký výskyt parazitózy v chudobných krajinách sú tieto lacné a ľahko použiteľné metódy ideálne na diagnostiku a monitorovanie týchto patológií.
nevýhody
Hustota flotačného roztoku spôsobuje kontrakciu lariev, to znamená, že sa zmenšujú a vo veľmi krátkom čase sa môžu deformovať. To núti skúšajúceho okamžite vykonať diagnózu a ošetrené vzorky nemôžu byť uchované pre budúce vyšetrenia.
Rovnako ako v prípade všetkých mikroskopických metód identifikácie, aj pri skúmaní presných diagnóz je potrebný vysoko skúsený personál.
Rýchla deformácia prvkov potrebných na diagnostiku, aj keď sú zjavnou nevýhodou, sa dá napraviť okamžitým mikroskopickým pozorovaním.
Referencie
- Ananias, FL (2017). Hodnotenie citlivosti Faustovej metódy a spontánnej sedimentácie pri diagnostike giardiázy. Cuban Journal of Tropical Medicine, 68 (2).
- Bartlett, MS, Harper, K., Smith, N., Verbanac, P., & Smith, JW (1978). Porovnávacie vyhodnotenie modifikovanej flotačnej techniky síranu zinočnatého. Journal of klinical microbiology, 7 (6), 524-528.
- Becker, AC, Kraemer, A., Epe, C. a Strube, C. (2016). Citlivosť a efektivita vybraných koproskopických metód - sedimentácia, kombinovaná sedimentácia síranu zinočnatého a flotácia a metóda McMaster. Parazitology research, 115 (7), 2581-2587.
- Garcia, LS, Arrowood, M., Kokoskin, E., Paltridge, GP, Pillai, DR, Procop, GW, & Visvesvara, G. (2018). Laboratórna diagnostika parazitov z gastrointestinálneho traktu. Prehľady klinickej mikrobiológie, 31 (1), e00025-17.
- Summers, WA (1942). Modifikácia odstredivej flotačnej metódy síranu zinočnatého na získanie vajíčok hlíst vo formalizovaných výkaloch. Journal of Parasitology, 28 (4), 345-346.
