NEFELOMETRIA: Z ČOHO POZOSTÁVA A APLIKÁCIE - CHÉMIA - 2026

Nefelometria zahŕňa meranie žiarenia spôsobené častíc (v roztoku alebo v kaši) a meranie výkonu rozptýleného žiarenia v uhle k smeru dopadajúceho žiarenia.

Keď je rozptýlená častica zasiahnutá lúčom svetla, je tu časť svetla, ktorá sa odráža, ďalšia časť je absorbovaná, ďalšia je odklonená a zvyšok je prenášaný. Preto keď svetlo dopadne na priehľadné médium, v ktorom je suspenzia pevných častíc, suspenzia sa javí zakalená.

Čo je nefelometria?

Disperzia žiarenia časticami v roztoku

V okamihu, keď svetelný lúč narazí na častice suspendovanej látky, zmení sa smer jeho šírenia. Tento účinok závisí od nasledujúceho:

1. Rozmery častice (veľkosť a tvar).

2. Charakteristiky suspenzie (koncentrácia).

3. Vlnová dĺžka a intenzita svetla.

4.Ostatná svetelná vzdialenosť.

5. Uhol detekcie.

6. Index lomu média.

Nephelometer

Nefelometer je prístroj používaný na meranie suspendovaných častíc v kvapalnej vzorke alebo v plyne. Preto fotobunka umiestnená v uhle 90 ° k svetelnému zdroju detekuje žiarenie z častíc prítomných v suspenzii.

Podobne svetlo odrážané časticami smerom k fotobunke závisí od hustoty častíc. Obrázok 1 predstavuje základné komponenty, ktoré tvoria nefelometer:

Obrázok 1. Základné komponenty nefelometra.

TO.

V nefelometrii je životne dôležité mať zdroj žiarenia s vysokým svetelným výkonom. Existujú rôzne typy, medzi inými xenónové žiarovky a ortuťové výbojky, volfrámové halogénové žiarovky, laserové žiarenie a iné.

B.

Tento systém je umiestnený medzi zdrojom žiarenia a kyvetou, takže sa týmto spôsobom zabráni žiareniu s rôznymi vlnovými dĺžkami v porovnaní s požadovaným žiarením.

Inak by fluorescenčné reakcie alebo účinky zahrievania v roztoku spôsobili odchýlky merania.

C.

Je to zvyčajne hranolový alebo valcový kontajner a môže mať rôzne veľkosti. V tomto je skúmané riešenie.

D.

Detektor je umiestnený v určitej vzdialenosti (zvyčajne veľmi blízko k kyvetě) a je zodpovedný za detekciu žiarenia rozptýleného časticami v suspenzii.

AND.

Všeobecne je to elektronický stroj, ktorý prijíma, prevádza a spracováva údaje, čo sú v tomto prípade merania získané zo štúdie.

odchýlky

Každé meranie podlieha percentuálnemu podielu chyby, ktorý je daný najmä:

Kontaminované bunky: v bunkách akékoľvek činidlo nachádzajúce sa mimo skúmaného roztoku, či už vo vnútri alebo mimo bunky, znižuje sálavé svetlo na ceste k detektoru (chybné bunky, prach priliehajúci k stenám bunky).

Rušenia : Prítomnosť mikrobiálnej kontaminanty alebo zákalu rozptyľuje žiarivú energiu a zvyšuje intenzitu disperzie.

Fluorescenčné zlúčeniny : jedná sa o zlúčeniny, ktoré pri excitácii dopadajúcim žiarením spôsobujú chybné a vysoké hodnoty hustoty rozptylu.

Uchovávanie reagencií : Nedostatočná teplota systému môže spôsobiť nepriaznivé študijné podmienky a môže viesť k prítomnosti zakalených alebo vyzrážaných reagencií.

Kolísanie elektrickej energie : Aby sa zabránilo tomu, že dopadajúce žiarenie bude zdrojom chyby, pre rovnomerné žiarenie sa odporúčajú stabilizátory napätia.

Metrologické charakteristiky

Pretože žiarivý výkon detekovaného žiarenia je priamo úmerný hmotnostnej koncentrácii častíc, nefelometrické štúdie majú - v teórii - vyššiu metrologickú citlivosť ako iné podobné metódy (napríklad turbidimetria).

Ďalej táto technika vyžaduje zriedené roztoky. To umožňuje minimalizovať absorpčné aj odrazové javy.

aplikácia

Nefelometrické štúdie majú v klinických laboratóriách veľmi dôležité postavenie. Aplikácia siaha od stanovenia imunoglobulínov a proteínov akútnej fázy, komplementu a koagulácie.

Detekcia imunitného komplexu

Ak biologická vzorka obsahuje požadovaný antigén, zmieša sa (v tlmivom roztoku) s protilátkou za vzniku imunitného komplexu.

Nefelometria meria množstvo svetla, ktoré je rozptýlené reakciou antigén-protilátka (Ag-Ac), a týmto spôsobom sú detegované imunitné komplexy.

Túto štúdiu je možné vykonať dvoma metódami:

Koncový bod nefelometria:

Táto technika sa môže použiť na analýzu koncových bodov, pri ktorej sa protilátka študovanej biologickej vzorky inkubuje počas dvadsaťštyri hodín.

Ag-Ac komplex sa meria pomocou nefelometra a množstvo rozptýleného svetla sa porovnáva s rovnakým meraním uskutočneným pred vytvorením komplexu.

Kinetická nefelometria

Pri tejto metóde sa kontinuálne monitoruje rýchlosť tvorby komplexov. Rýchlosť reakcie závisí od koncentrácie antigénu vo vzorke. Merania sa tu vykonávajú ako funkcia času, takže prvé meranie sa vykonáva v čase „nula“ (t = 0).

Kinetická nefelometria je najčastejšie používanou technikou, pretože štúdia sa môže vykonať do 1 hodiny v porovnaní s dlhým časovým obdobím metódy koncového bodu. Disperzný pomer sa meria ihneď po pridaní činidla.

Preto, pokiaľ je činidlo konštantné, množstvo prítomného antigénu sa považuje za priamo úmerné rýchlosti zmeny.

Ďalšie aplikácie

Nefelometria sa všeobecne používa pri analýze chemickej kvality vody, na stanovenie priezračnosti a na kontrolu jej procesov úpravy.

Používa sa tiež na meranie znečistenia ovzdušia, pri ktorom sa koncentrácia častíc určuje z disperzie, ktorú vytvárajú v dopadajúcom svetle.

Referencie

1. Britannica, E. (nd). Nefelometria a turbidimetria. Obnovené zo stránky britannica.com
2. Al-Saleh, M. (nd). Turbidimetria a nefelometria. Zdroj: pdfs.semanticscholar.org
3. Bangs Laboratories, Inc. (nd). Získané z webu technochemical.com
4. Morais, IV (2006). Analýza turbidimetrického a nefelometrického toku. Získané z úložiska.ucp.p
5. Sasson, S. (2014). Princípy nefelometrie a turbidimetrie. Získané z notesonimmunology.files.wordpress.com
6. Stanley, J. (2002). Základy imunológie a sérologie. Albany, NY: Thompson Learning. Získané z kníh.google.co.ve
7. Wikipedia. (SF). Nefelometria (medicína). Obnovené z en.wikipedia.org