BACILOSKOPIA: POSTUP, NA ČO SLÚŽI A TYPY - LIEK - 2025

Ster je diagnostický nástroj pre aktívne pľúcnej tuberkulózy. Je to laboratórna technika, ktorá umožňuje detekciu a meranie acidorezistentných bacilov, ako je napríklad Mycobacterium tuberculosis. Je to najpoužívanejšia metóda na svete na stanovenie diagnózy aktívnej pľúcnej tuberkulózy v komunite a na vyhodnotenie výhod liečby.

Pľúcna tuberkulóza je infekčné ochorenie spôsobené Mycobacterium tuberculosis, ktoré infikuje pľúca, ale môže ovplyvniť iné orgány a systémy. Na celom svete trpí pľúcnou tuberkulózou (TB) viac ako 6 miliónov ľudí.

Bunky M. tuberculosis v spúte (Zdroj: Microrao / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0) prostredníctvom Wikimedia Commons)

Mycobacterium tuberculosis a iné netuberkulózne druhy Mycobacterium majú na bunkovej stene lipidový povlak, ktorý je bohatý na kyselinu mykolovú, ktorá je po zafarbení zásaditými farbivami rezistentná na odfarbenie kyslého alkoholu.

Preto sa používajú špeciálne spôsoby farbenia, ako je napríklad metóda Ziehl-Neelsen. Tieto jednoduché a lacné metódy umožňujú, aby si stena zachovala zafarbenie, keď sa vzorka prepláchla kyslým roztokom a stena Mycobacterium zčervenala na rozdiel od iných baktérií, ktoré sa zafarbili modro.

Na vykonanie mikroskopu na rozmazanie je potrebná vzorka spúta, najlepšie odobraná ráno, keď vstanete. Môžu sa použiť aj vzorky tkanív alebo vzorky telesných tekutín.

proces

Vzorky, ktoré sa majú spracovať pre mikroskopické mikroskopy, sú vzorky spúta, vzorky tkanív alebo vzorky telových tekutín. Vzorky tkanív sa môžu extrahovať bronchoskopiou alebo biopsiou lymfatických uzlín alebo iných tkanív.

Keďže tuberkulóza môže ovplyvniť akýkoľvek orgán alebo systém, vzorky sa môžu veľmi líšiť, vrátane: vzoriek moču, mozgovomiechového moku, pleurálnej tekutiny, ascitickej tekutiny, krvi, hnisu z otvorených dutín, biopsie , atď.

Vzorky extrapulmonálnej lézie by sa mali spracovať aj na kultiváciu. Vzorky spúta sa odoberajú v ranných hodinách po raste.

Odoberať možno niekoľko vzoriek za sebou alebo za sebou nasledujúce dni. Vzorky by sa mali označovať v uzavretých fľašiach so širokým hrdlom. Mali by mať k dispozícii údaje o pacientovi, typ vzorky a dátum odberu vzorky.

Technický postup

- Keď je vzorka získaná, môže sa odstrediť na koncentrovanie alebo použiť priamo. Počiatočný postup spočíva v tom, že niekoľko kvapiek vzorky sa nanesie na podložné sklíčko.

- Vzorka je pokrytá filtrovaným fuchsínom (farbiaci roztok).

- Potom sa zahrieva, až kým nedosiahnu asi tri emisie belavej pary.

- Počkajte päť minút, až vychladne vzorka a umyte ju vodou.

- Je pokrytý bieliacim roztokom (kyslý alkohol) počas 2 minút.

- Znovu sa premyje vodou.

- Vzorka sa prikryje metylénovou modrou a nechá sa stáť jednu minútu.

- Vyplavuje sa vodou.

- Nechajte schnúť na vzduchu a pokračujte pod pozorovaním pod mikroskopom.

Fotografie z mikroskopu (Obrázok Konstantin Kolosov na www.pixabay.com)

Tento postup je rýchly, jednoduchý, lacný a umožňuje bunkám Mycobacterium tuberculosis farbiť červeno. Táto technika sa nazýva Ziehl-Neelsenova farbiaca technika.

Mikroskopické pozorovanie spočíva v identifikácii prítomnosti kyslých rýchlych bacilov a ich kvantifikácii podľa poľa.

Bunky Mycobacterium tuberculosis sa javia ako červené, granulované, zakrivené tyčinky na modrom pozadí. Môžu byť izolované, spárované alebo zoskupené. Pozorovanie by sa malo vykonávať po poliach a pri každom nátere by sa malo vyšetriť najmenej 100 polí.

Výsledok sa považuje za pozitívny, ak v každej oblasti existuje viac ako 10 buniek M. tuberculosis. To zodpovedá 5 000 až 100 000 bacilov na každý mililiter vzorky.

V týchto prípadoch sa považuje za pozitívny na Mycobacterium tuberculosis, pretože nububertúrne Mycobacterium alebo iné baktérie rezistentné na kyseliny majú rôzne formy a obvykle je množstvo pozorované na jedno pole menšie ako 10.

Osoba, ktorá skúma vzorku, musí mať skúsenosti alebo odborné znalosti v zisťovaní a rozpoznávaní týchto mikroorganizmov, pretože vo výsledkoch môžu byť falošné negatívy alebo falošné poplachy.

Existujú aj iné fluoroskopické techniky, ktoré sú citlivejšie, ale oveľa drahšie. Jedna takáto technika využíva farbenie Auramínu-O na získanie zelenej fluorescencie alebo farbenie Auramínu O / Rhodamínu B na pozorovanie žlto-oranžovej fluorescencie.

Pozitívne prípady sa zvyčajne považujú za kultúru a antibiogram, aby sa potvrdila diagnóza a vhodný výber liečby.

Na čo slúži mikroskopická mikroskopia?

Tuberkulóza je infekčné ochorenie postihujúce pľúca a iné orgány a orgánové systémy tela. Je to nákazlivé ochorenie, ktoré spôsobuje vážne poškodenie dýchacích ciest a ktoré, ak sa správne nelieči, môže spôsobiť smrť pacienta.

Tuberkulóza sa prenáša takmer výlučne kvapôčkami suspendovanými vo vzduchu z expektorácie pacienta infikovaného pľúcnou tuberkulózou. Tieto malé kvapôčky môžu zostať vo vzduchu a majú schopnosť infikovať osobu, ktorá ich vdychuje.

Bunky M. tuberculosis (Zdroj: NIAID / CC BY (https://creativecommons.org/licenses/by/2.0) prostredníctvom Wikimedia Commons)

Infekcia vyžaduje predĺžený kontaktný čas s infikovaným pacientom, ktorý nepretržite pije bacily v zle vetranom prostredí. Ľudia s imunodeficienciou sa nakazia častejšie.

U HIV pozitívnych pacientov je väčšia pravdepodobnosť, že u zvyšku populácie vyvinú vážne respiračné infekcie vrátane pľúcnej tuberkulózy. Preto je dôležitá mikroskopická mikroskopia ako rýchla a lacná diagnostická metóda pre tuberkulózu.

Rozterová mikroskopia umožňuje bakteriologickú diagnostiku tuberkulózy, avšak pozitívny výsledok sa musí potvrdiť inými štúdiami.

Štúdie, ktoré potvrdzujú diagnózu tuberkulózy, zahŕňajú rádiologické vyšetrenia, ktoré ukazujú charakteristické obrazy v horných lalokoch pľúc, pozitívne tuberkulínové testy a pozitívne vzorky kultúr.

Rozmazať negatívne

Mikroskopia s negatívnym náterom nevyhnutne nevylučuje diagnózu tuberkulózy, pretože najmä v prípade, keď ide o vzorku spúta, nie je eliminácia bacilov konštantná. Preto v týchto prípadoch, keď existuje podozrenie na diagnózu, sú potrebné sériové vzorky.

Pozitívny náter

Pozitívna náterová mikroskopia svedčí o tuberkulóze a musí sa potvrdiť ďalšími doplnkovými štúdiami. Vždy, keď je výsledok pozitívny, mala by sa urobiť kultúra a antibiogram.

Akonáhle je liečba zavedená, trvalé zníženie rozsahu pozitivity mikroskopickej mikroskopie do dosiahnutia negatívnych výsledkov umožňuje kontrolovať výhody liečby.

Referencie

1. Aziz, MA (2002). Externé hodnotenie kvality AFB mikroskopu.
2. Desikan, P. (2013). Mikroskopia spúta pri tuberkulóze: je to stále relevantné? Indický časopis lekárskeho výskumu, 137 (3), 442.
3. Fauci, AS, Kasper, DL, Hauser, SL, Jameson, JL a Loscalzo, J. (2012). Harrisonove princípy vnútorného lekárstva (ročník 2012). DL Longo (ed.). New York: Mcgraw-hill.
4. Ngabonziza, JCS, Ssengooba, W., Mutua, F., Torrea, G., Dushime, A., Gasana, M.,… & Muvunyi, CM (2016). Diagnostická výkonnosť mikroskopu v nátere a inkrementálneho výťažku Xperta pri detekcii pľúcnej tuberkulózy v Rwande. Infekčné choroby BMC, 16 (1), 660.
5. Sardiñas, M., García, G., Rosarys, MM, Díaz, R., & Mederos, LM (2016). Dôležitosť kontroly kvality bacilskopie v laboratóriách, ktoré vykonávajú diagnostiku tuberkulózy. Čílsky úrad pre infekciu: Úradný orgán Čílskej spoločnosti pre infekciu, 33 (3), 282-286.
6. Sequeira de Latini, MD, a Barrera, L. (2008). Manuál pre bakteriologickú diagnostiku tuberkulózy: normy a technická príručka: mikroskopia s mikroskopom 1. časti. V Príručke pre bakteriologickú diagnostiku tuberkulózy: normy a technická príručka: mikroskopia s mikroskopom podľa časti 1 (s. 64 - 64).